貧血是指人體外周血紅細胞容量減少，低于正常范圍下限的一種常見(jiàn)的臨床癥狀。溶血性貧血是由于紅細胞的破壞增速、增多，超過(guò)造血補償能力范圍時(shí)所發(fā)生的一種貧血。斑馬魚(yú)造血系統的形成，包括紅系、髓系、淋系及巨核系為主的造血系統，其相關(guān)的轉錄因子及信號轉導通路同人類(lèi)有高度的同源性，這些特點(diǎn)使斑馬魚(yú)在人類(lèi)造血系統和血液疾病的研究中有著(zhù)更加大量的應用。研究表明，苯肼是一種溶血劑。苯肼作用于紅細胞膜，加速膜表面亮氨酸、賴(lài)氨酸及組氨酸的水解，使大量紅細胞迅速遭到破壞；同時(shí)可選擇性地氧化膜骨架和α珠蛋白，并將磷脂酰絲氨酸易位至紅細胞表面，導致紅細胞變形性降低，增強紅細胞黏附到細胞外基質(zhì)的能力從而破壞循環(huán)血中的成熟紅細胞，使血紅蛋白變性聚集、形成Heinz小體，使得紅細胞的破壞速度遠大于機體紅細胞再造的能力，導致機體發(fā)生溶血性貧血。用鄰聯(lián)茴香胺染色法對紅細胞進(jìn)行特異性染色（呈紅色），貧血斑馬魚(yú)心臟部位的紅細胞較正常斑馬魚(yú)明顯減少。由于斑馬魚(yú)早期出現血液循環(huán)時(shí)胚胎透明，在解剖顯微鏡下可以觀(guān)察到。斑馬魚(yú)模型評價(jià)基因毒品安全性和有效性評價(jià)

我們將受測試斑馬魚(yú)分成三組，分別是正常對照組、模型對照組和改善貧血藥物組。其中正常對照組未攝入苯肼，模型對照組與改善貧血藥物組都攝入了等量的苯肼（苯肼通過(guò)溶解到養魚(yú)用水中的方式攝入到斑馬魚(yú)體內）。服用改善貧血藥物組先攝入生血寧之類(lèi)的改善貧血藥物后，再加入苯肼。服用改善貧血藥物一段時(shí)間后，再加入苯肼共同處理一段時(shí)間。我們對斑馬魚(yú)整體做紅細胞特異性染色，經(jīng)過(guò)分析斑馬魚(yú)的紅細胞數量（染色強度）。可以看到，模型對照組紅細胞數量（染色強度）較正常對照組明顯減少，服用改善貧血藥物組的紅細胞數量（染色強度）與正常對照組比較相似，沒(méi)有明顯的紅細胞減少情況。藥物體外實(shí)驗藥物臨床前研究實(shí)驗。

正常成人的心率在每分鐘60～100次之間，如果低于60次稱(chēng)為心動(dòng)過(guò)緩，是心律失常的一個(gè)重要類(lèi)型，患者平時(shí)有頭暈、乏力、倦怠、精神差的癥狀。研究表明，斑馬魚(yú)心血管系統的發(fā)育與人高度相似，雖然斑馬魚(yú)是單心房單心室，但其心臟結構及功能與人高度保守。同時(shí)，由于斑馬魚(yú)具有透明易觀(guān)察等優(yōu)點(diǎn)，開(kāi)始被大量應用于心血管疾病研究和藥物心血管毒性評價(jià)當中。維拉帕米能阻滯心肌細胞慢通道，抑制Ca2+向細胞的內流，阻礙心臟慢反應電活動(dòng)，降低舒張期去極化速度，抑制竇房結的自律性，減慢心率；亦能延長(cháng)房室結的有效不應期，減慢房室傳導。用解剖顯微鏡下觀(guān)察斑馬魚(yú)心率，模型對照組斑馬魚(yú)心率較正常斑馬魚(yú)明顯減慢。

斑馬魚(yú)的基因與人類(lèi)基因的相似度達到87％，斑馬魚(yú)肝臟中有許多與哺乳動(dòng)物同源的脂質(zhì)代謝酶，與哺乳動(dòng)物對外源化學(xué)物質(zhì)的防御機制相當，包括酶的誘導和氧化應激。而且斑馬魚(yú)幼魚(yú)通體透明，容易觀(guān)察到毒性表型。酒精性肝損傷是全世界發(fā)病率和死亡率的主要原因，酒精性肝損傷是過(guò)量飲酒的結果。當患者繼續飲酒時(shí)，會(huì )誘發(fā)嚴重的肝損傷形式，如脂肪性肝炎，纖維化，肝硬化和肝細胞。用乙醇可以誘發(fā)斑馬魚(yú)肝臟損傷，模擬人的肝臟疾病。我們評價(jià)斑馬魚(yú)肝臟毒性有4個(gè)指標：1.肝臟面積；2.肝臟變性程度；3.卵黃囊吸收延遲的發(fā)生率（卵黃囊是脂肪，卵黃囊吸收與肝功能密切相關(guān)）；4.肝臟病理切片。利用斑馬魚(yú)模型評價(jià)糖尿病神經(jīng)炎癥消退功效。

利用斑馬魚(yú)模型評價(jià)抗氣滯血瘀型血栓作用【評價(jià)原理】斑馬魚(yú)的基因與人類(lèi)基因的相似度達到87％，斑馬魚(yú)血液系統與人類(lèi)血液系統的血小板和凝血因子有許多共同點(diǎn)。大劑量腎上腺素（AH）能夠引起動(dòng)物血管內皮損傷和血小板活性增強，造成體內處于高凝狀態(tài)。腎上腺素的大量增加模擬人體暴怒、大怒，導致氣機阻滯，氣滯血瘀。經(jīng)過(guò)特異性紅細胞染色（鄰聯(lián)茴香胺染色），患有血栓的斑馬魚(yú)在尾部靜脈會(huì )布滿(mǎn)紅細胞，可以明顯被觀(guān)察到。本實(shí)驗證實(shí)了阿司匹林和氯吡格雷具有明顯抗血栓作用。斑馬魚(yú)評價(jià)胃腸道粘膜損傷輔助保護功效。動(dòng)物藥理學(xué)試驗報告

關(guān)于藥物安全性的評價(jià)。藥品安全性和有效性評價(jià)

斑馬魚(yú)和哺乳動(dòng)物的心臟有相似的功能，包括血流方向、由專(zhuān)門(mén)的心內膜肌肉組織驅動(dòng)的高壓系統、由電子系統調節的心律以及與起搏活動(dòng)相關(guān)的心跳。斑馬魚(yú)對典型的心臟的藥理學(xué)反應與人類(lèi)相似。斑馬魚(yú)受精后48h，心血管系統功能全，呈現出例子通道和代謝過(guò)程的復雜性。因此，可以應用斑馬魚(yú)評價(jià)藥物對心衰的防治作用。維拉帕米是苯烷胺類(lèi)鈣離子拮抗劑,其誘導心力衰竭的藥理學(xué)基礎有以下三方面:（1）對心臟的抑制作用,即負性頻率、負性傳導及負性肌力作用,且為劑量依賴(lài)性;（2）擴張血管作用,即對外周血管具有明顯的擴張作用,使外周阻力降低,平均動(dòng)脈壓下降;（3）減少冠脈血流,降低心肌血供。我們用維拉帕米建立斑馬魚(yú)心衰模型。患有心衰的斑馬魚(yú)與正常斑馬魚(yú)比較，出現心包水腫、靜脈瘀血、心搏出量減少和血流速度減慢，由于斑馬魚(yú)通體透明的特點(diǎn)，可以明顯被觀(guān)察到。藥品安全性和有效性評價(jià)

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